ADN de alta calidad a partir de sangre total almacenada por largo tiempo para amplificación por PCR

Abstract

Los métodos reportados hasta la fecha sobre extracción y purificación de ADN de sangre emplean muestras frescas o almacenadas en congelamiento a -20ºC y descartan la posibilidad de utilizarlas cuando han permanecido por más de un año a temperaturas menores. El artículo reporta el aislamiento de ADN genómico utilizando una modificación del método de purificación salina, reportado por Miller1 a partir de sangre total almacenada sin mezclas especiales, durante más de un año a 4ºC. El ADN obtenido fue de buena calidad, con alto peso molecular y mínimo contenido de sustancias inhibidoras, características que lo hacen adecuado para amplificación por PCR. El 84% de las muestras fueron positivas para la amplificación por PCR del gen Apo E. El ADN extraído por este método fue también apto para posterior digestión con la enzima de restricción Hha I, lo que garantiza la utilidad de este método simple y rápido en los análisis moleculares.